Post on 02-May-2015
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Enzimologia clinica
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Scopo
valutare la concentrazione degli enzimi nei fluidi corporei a fini diagnostici
Enzimi: catalizzatori biologici aumentano la velocità di una reazione senza essere consumati
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Cinetica Enzimatica
Enzimi a substrato singoloEs. Amilasi, lipasi
Enzimi a substrati multipli
E + S ES EP E + P
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reactants
products
Fre
e E
nerg
y G*
Go
Free energyof activation
Free energychange
uncatalyzed
reactants
productsFre
e E
nerg
y
Reaction Progress
catalyzed
Cinetica Enzimatica
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Velocità di reazione
Influenzata da concentrazione di
substrato concentrazione di
enzima temperatura pH cofattori coenzimi attivatori inibitori
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Legge di Michaelis-Menten
Basse concentrazioni Reazione di primo ordine
Alte concentrazioni Reazione di ordine 0
Costante di Michaelis-Menten è la concentrazione di
substrato che corrisponde ad una velocità di reazione pari al 50% del massimo
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Enzimi: specificità di substrato
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Localizzazione Enzimatica
Liberi nelle cellule di diversi tessuti ed organi
Confinati in particolari strutture all’interno delle cellule stesse
In un determinato tessuto od organo specifico enzimi organo specifici
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Gli enzimi nel sangue spesso non hanno un ruolo fisiologico presenti anche in situazioni normali
invecchiamento fisiologico turnover cellulare
eliminati da sistema reticolo endoteliale Rene (es. amilasi)
livello di attività normale nel siero è funzione di velocità di rilascio clearance
emivita 2 ore (CK-BB) 170 ore (ALP placentare)
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Aumento degli enzimi nel plasma:
1. necrosi o danno cellulare citolisi fuoriuscita enzimi Fattori tossici Ischemia
2. aumentato turnover cellulare Accrescimento Rigenerazione cellulare Neoplasie Gravidanza
3. Induzione enzimatica Farmaci (es.
Fenobarbital, alcool) Patologie (es. colestasi)
4. Ostruzione dei dotti escretori enzimi presenti nelle secrezioni esocrine si trovano nel plasma
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Liberazione enzimi nel circolo
la velocità di comparsa nel sangue dipende dapassaggio nel
sangue diretto attraverso il circolo
linfatico localizzazione
intracellulare citoplasmatica mitocondriale
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Fluidi utilizzati
sierosangueplasmaorineliquor cefalorachidianoversamentifluidi extracellulari
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usi
patologie epatichepatologie cardiachepatologie muscolaripatologie pancreatichepatologie osseepatologie autoimmunipatologie gastroentericheneoplasie
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controllo di ed ottimizzazione dipH temperatura
concentrazione di substrato che permetta di ottenere una cinetica di grado 0
metodiche immunologiche
Metodiche di analisi
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Metodiche enzimatichecontrollo di ed ottimizzazione di
pH temperatura
concentrazione di substrato che permetta di ottenere una cinetica di grado 0
metodiche immunologiche
Metodiche di analisi