CELL BLOCK
Preparazione e uso per immunoistochimica
Valentina Bartolucci
UOC Anatomia Patologica - Università Campus Biomedico Roma
EXPOSANITA’ 2018
PATOLOGIA NODULARE DELLA TIROIDE: focus sugli approcci diagnostici
COSA E’ UN CELL BLOCK?
E’ una metodica di allestimento che permette di ottenere un
preparato in paraffina a partire da un campione citologico.
Questa metodica permette di allestire numerosi vetrini per
colorazioni speciali e immunoistochimica da un unico blocchetto.
Aumenta sensibilità e specificità diagnostica rispetto allo striscio
classico.
PLASMA/TROMBINA
Tra le prime metodiche a essere utilizzata per la semplicità e la facilità di
reperimento dei materiali.
La trombina si acquista mentre il plasma viene fornito dal laboratorio analisi.
Metodica:
1. Centrifugazione
2. Scarto del sovranatante
3. 4 gocce di plasma per ogni ml di sedimento
4. 4 gocce di trombina
5. Risospendere
6. Lasciare riposare qualche minuto fino alla formazione del coagulo
7. Recuperare il coagulo e fissarlo in formalina
ALBUMINA
Metodica piuttosto rapida con un unico limite, non funziona se il paziente ha
assunto anticoagulanti.
Si basa sulla coagulazione dell’albumina bovina.
Metodica:
1. Centrifugazione
2. Scarto del sovranatante
3. 2-3 gocce di albumina bovina al 30%
4. Fissare in alcol 95°
5. Lasciare riposare qualche minuto fino alla formazione del coagulo
6. Recuperare il coagulo e fissarlo in formalina
GEL AGGREGANTI: AGAR/HISTOGEL
Sono entrambi gel che vengono fusi ad alte temperature, aggiunti al pellet, una
volta raffreddati trattengono al loro interno le cellule e possono essere
processati come un qualunque campione istologico.
E’ una metodica più lunga delle altre ma permette di ottenere ottimi risultati.
CELLIENT®
E’ uno strumento che permette di automatizzare l’allestimento e la
processazione dei citoinclusi.
Metodica:
• Il campione viene concentrato in un filtro grazie ad un
sistema sottovuoto.
• Questo pellet viene fissato con un fissativo a base di
metanolo. Si può utilizzare anche la formalina per una
questione di rispetto dei protocolli di immunoistochimica
del laboratorio.
• Il pellet viene processato e incluso in un blocchetto di
paraffina.
• Tutto il processo dura 45 minuti per singolo campione.
CELL BLOCK VS STRISCIO: VANTAGGI
Le cellule sono concentrate in un punto preciso del vetrino.
Possibilità di allestire ulteriori vetrini a partire dallo stesso pellet, anche a
distanza di tempo.
I cell block vengono fissati in formalina, quindi si possono eseguire tutte le
colorazioni speciali e immunoistochimica come su preparato istologico.
Il campione è rappresentato nella sua totalità compresi aggregati cellulari o
frammenti di tessuto (riconoscimento pattern tumorale).
CELL BLOCK VS STRISCIO: SVANTAGGI
Tempo: L’allestimento dei citoinclusi rispetto allo striscio richiede molto più
tempo.
Impiego di un operatore dedicato: L’allestimento del citoincluso a differenza
dello striscio può essere eseguito solo in laboratorio dal personale tecnico
addestrato, mentre lo striscio può essere allestito in ambulatorio da diverse
figure professionali.
IMMUNOISTOCHIMICA
I campioni allestiti come cell block vengono fissati in formalina.
Questo permette di effettuare immunoistochimica senza modificare i protocolli
ottimizzati per l’istologia, permettendo così standardizzazione e riproducibilità.
Vengono allestiti vetrini con sezioni spesse 4 µm.
Anticorpi testati su agoaspirato tiroideo:
HBME-1
GALECTINA3
CD56
CK 19
TIREOGLOBULINA
TTF-1
CALCITONINA