Alvaro Leone
Unit of Pathology San Camillo-Forlanini Hospital, Rome, [email protected]
La biologia molecolare nell'era delle target therapies: perchè è necessario un feedback continuo tra la clinica ed il
laboratorio?
IV Edizione Corso ECM
ROMA 9-10 Maggio 2013Hotel Shangri-La CorsettiLa Biologia Molecolare applicata alla pratica clinica
Blocking INSIDEwith TKIs (gefitinib-erlotinib)
Proliferation
Invasion Metastasis
Inhibitionof apoptosis
1. Leserer M et al. 1. Leserer M et al. IUBMB LifeIUBMB Life. 2000;49:405-409. 2. Raymond E et al. . 2000;49:405-409. 2. Raymond E et al. DrugsDrugs. 2000;60(suppl 1):15-23.. 2000;60(suppl 1):15-23. 3. Prenzel N et al. 3. Prenzel N et al. Endocr Relat CancerEndocr Relat Cancer. 2001;8:11-31.. 2001;8:11-31.
Also in the presence Of the ligand
EGFR activating mutations in NSCLC
microdeletion
Point mutation
• EGFR receptor
Exon 19 microdeletion (70-80%)
L858R point mutation in exon 21 (20-30%)
La resistenza alle target-therapies
Praticamente tutti i pazienti trattati con TKI sviluppanoresistenza con una mediana di 19 mesi
La sequenza del gene EGFR a progressione rivela la presenza di una seconda mutazione puntiforme che produce la sostituzione di una treonina in metionina in posizione 790 (T790M)
NEJM 352;8 february 24, 2005
Sono tutte vicine al sito di legame dell'ATP e producono un importante cambiamento della conformazione del recettore
Amplificazione del C-Met
• 21% nei tumori in progressione (il 40% hanno una concomitante mutazione T790M)
Synergistic transforming activity of T790M in cis with EGFR mutations
Godin-Heymann et al. Cancer Res. 2007 august 1; 67(15):7319-7326
T790M/Del
Del
T790M
H-Ras
Postprogression survival (A) and time from progression until new metastasis (B), depending on T790M mutation status.
Oxnard G R et al. Clin Cancer Res 2011;17:1616-1622
©2011 by American Association for Cancer Research
Highly Sensitive Detection of EGFR T790M Mutation Using Colony Hybridization Predicts Favorable Prognosis of Patients with Lung Cancer Harboring Activating EGFR Mutation
Fujita y et al. J Thoracic oncology 2012; 7:1640-44
Highly Sensitive Detection of EGFR T790M Mutation in Pre-TKI Specimens of EGFR-Mutated NSCLC: In Cis, In Trans, or a Different Clone?
A. Leone: J Thoracic Oncology 2013: 8(3):p:e26-e27
EGFR Mutation and Resistance of Non–Small-Cell Lung Cancer to Gefitinib
Susumu Kobayashi et al. N England J Med 2005; 352:786-792
To obtain further evidence of the presence of a second mutation, cDNA was generated from RNA isolated from the paraffin block of the biopsy specimen obtained at the time of relapse. The cDNA was amplified, and the C-to-T base-pair change was confirmed in 14 of 40 subclones. Interestingly, the C-to-T base-pair change was consistently observed with either wild-type or delL747–S752 sequences, suggesting that the mutation is either biallelic or that the tumor has two distinct populations of cells.
Peptide nucleic acid–locked nucleic acid polymerase chain reaction clamp-based detection test for gefitinib-refractory T790M epidermal growth factor receptor mutation
1. Hitoshi Miyazawa et al. Cancer Sci 2008; 99:595-600
Next we subcloned the RT-PCR product into a plasmid, picked up 13 clones and sequenced them. Two out of the 13 clones had both the T790M and L858R mutations; the remaining 11 had only the L858R mutation
Considerazione:
Dobbiamo tornare alla ricerca di base per comprendere meglioIl ruolo della posizione reciproca delle mutazioni attivanti e resistenti nella progressione della malattia non più responsiva ai TKI
Superare le resistenze
1. Strategie per ritardarne l'insorgenza
2. Studio di farmaci di nuova generazione
Does T790M Disappear? Successful Gefitinib Rechallenge After T790M Disappearance in a Patient With EGFR-Mutant Non–Small-Cell Lung Cancer
Hata, Akito MD; Katakami, Nobuyuki MD, PhD; Kaji, Reiko MD; Fujita, Shiro MD, PhD; Imai, Yukihiro MD, PhD
J Thoracic Oncology Volume 8 (3) march 2013
Considerazione:
bisogna tornare alla ricerca preclinica per studiare approcci alternativi (interruzione di TKI, terapie combinate) per ritardare l'insorgenza della resistenza mediata dalla T790M
Farmaci anti-resistenza di nuova generazioneSono allo studio tirosin-chinasi inbitori, in grado di bloccare in modo irreversibile più membri della famiglia EGFR
Studi preclinici hanno dimostrato che l'Afatinib è efficace in modelli sperimentali inclusi i tumori con resistenza T790M mediata
Il vero successo della biologia molecolare è stato il cambio di visione prospettica rispetto al trattamento del
Paziente oncologico
• Patient• Surgeon
Pathologist• Histology• Diagnosis• Oncologist
• Patient• Surgeon• Pathologist• Source of information • Oncologist• Pathologist
Pre- Molecular-era Molecular-era
Ritorno al laboratorio
La letteratura e le pratiche in atto per la cura delle neoplasie resistenti non riflettono in maniera accurata la loro natura sistemica!
L'approfondita comprensione della loro biologia molecolareè essenziale per la messa a punto delle più appropriate strategie terapeutiche
perchè è necessario un feedback continuo tra la clinica ed il laboratorio?