Marcella Zollino

mzollino@rm.unicatt.it

Istituto di Genetica Medica Università Cattolica Sacro Cuore, Roma Aula Brasca, 20 settembre 2014

Sindrome di Pitt-Hopkins

1978 prima descrizione clinica (Pitt e Hopkins)

6-8 casi

2007 identificazione del gene

Amiel et al, Am J Hum Genet, 2007

Zweier et al, Am J Hum Genet, 2007

2010 pubblicati in tutto 60 casi

2014 noti circa 200 casi

“Reverse dysmorphology”

Citogenetica molecolare: del 18q21 (2 casi)

TCF4 gene candidato mutazioni in individui non deleti

TCF4

• 18q21.1

• fattore di trascrizione bHLH

• espresso nel cervello, muscoli scheletrici, differenziazione neuroni ponte, mesenchima

• Agisce come oncogene quando deregolato

• interagisce con la proteina ASCL1 del pathway PHOX-RET ruolo nello sviluppo dei derivati noradrenergici

HSCR

Stipsi grave

Anomalie del respiro

PTHS

Encefalopatia non progressiva

Assenza linguaggio

Epilessia

Microcefalia

Stereotipie motorie

Diagnosi differenziale con s. di Angelman (AS)

s. di Rett (RTTS)

PTHS: studio presente

Pazienti analizzati 87

CRITERI DI INCLUSIONE

Disabilità intellettiva grave

Test genetico negativo per

AS

RTTS

(S. Mowat-Wilson)

Fenotipo facciale e generale consistente

METODI di ANALISI GENETICA

1) array-CGH o FISH con le sonde BACs 18q21.2/TCF4-specifiche RP11-345B7 RP11-7L24 RP11-222I18 RP11-397A16 (53,3-53,5), 2) MLPA kit P075 (SALSA MLPA Kit MRC Holland) 3) sequenziamento diretto gene TCF4 4) esame cromosomico convenzionale

• delezione completa (1 Mb, FISH) 2 DIAGNOSTICABILE tramite array-CGH di routine • mutazioni missenso 12 • mutazioni nonsenso 2 • mutazioni con frameshift 6

• “gene dysruption” da traslocazione bilanciata: 2

PTHS: il difetto genetico

NECESSARIA SELEZIONE CLINICA

c.1689dupA p.E564RfsX3

c.1563_1567delAACC insTT p.N521FfsX13

c.1738C>T p.R580W*

c.1733G>A p.R578H* (2 patients)

= missense mutation

= splicing site mutation

= nonsense mutation

= truncating frameshift mutation

= frameshift mutation (longer protein)

= partial gene deletion

TCF4

bHLH

c.1450 del T p.S484P fsX4

c.1515_1520delTGTCTCinsATTTGAT p.S505RfsX8 c.1867 C>T p.Q623X

c.1343 C>G p.S448X c.550-1 G>C

c.1518insGT p.S507VfsX29

complete gene deletion

Chr 14 Chr 18

t(14;18)(q13;q21.2) A

CEN

52,80 52,85

18q21.2 TEL

52,90 52,95 53,00 53,05 53,10 53,15 53,20 53,25 53,30 Mb

TCF4

RP11-222I18 RP11-7L24

RP11-345B7

Region translocated on 14q

Reverse strand – 366.3 kb

Exons 12,13,14,15 + Introns 12,13,14 (7,3 kb)

Exons 16,17,18,19 + Intron 16,17,18 (6,6 kb)

FISH probes obtained

from Long-Range PCR

amplicons

18

18

14

18

18

14

14 18

Chr18 Chr18

B

%

Parametri crescita normali alla nascita (OFC inclusa) 100

Facies caratteristica 90

Deficit intellettivo significativo/linguaggio assente 100

Atassia/incoordinazione/difficoltà equilibrio 100

PTHS: segni clinici

Facies peculiare

Occhi infossati

Epicanto

Naso a base allargata

Narici allargate

Bocca carnosa

Labbro superiore ad M

Guance paffute (prevalenza metà inferiore del volto)

Strabismo

Orecchie a conca con elice ispessito

Denti spaziati

Filtro breve

% Strabismo/astigmatismo/miopia 83

Epilessia (esordio tardivo) 67

Anomalie del respiro 67

iperventilazione apnee Stipsi 60

Microcefalia postnatale 50

Peso/altezza – 1 DS 34 Peso/altezza 50° 66 Anomalie RMN encefalo 60

dilatazione ventricolare asimmetrie solchi cerebrali

Malformazioni maggiori No Ipotonia Movimenti finalizzati delle mani Non ilarità immotivata Carattere tranquillo, docile Stereotipie delle mani (rare “hand washing” e sfarfallio)

a

b

GRAZIE

Giuseppe Marangi Marina Murdolo Daniela Orteschi Serena Lattante Stefania Ricciardi A tutti i colleghi che hanno inviato i pazienti ALLE FAMIGLIE