RETICOLOCITI: DEFINIZIONE (CLSI H44-A2)
- CELLULE ERITROIDI DI TRANSIZIONE FRA IL PRECURSORE
NUCLEATO E L’ERITROCITA MATURO
- DEFINIZIONE MICROSCOPICA: CELLULE CHE CONTENGONO
ALMENO 2 GRANULI COLORABILI CON NMB, VISIBILI SENZA
AGGIUSTAMENTO DEL FUOCO E LONTANI DAL MARGINE
CELLULARE
DIMOSTRAZIONE IN VITRO DELLA RIELABORAZIONE
STRUTTURALE DELLA MEMBRANA CITOPLASMATICA
RETICOLOCITARIA
Chasis et al,
Blood 1989
VARIAZIONI STRUTTURALI NEL PASSAGGIO DA
RETICOLOCITA AD ERITROCITA MATURO
(soggetti normali)
- RIDUZIONE DEL VOLUME (~ 19%)
- PERDITA DEL CONTENUTO EMOGLOBINICO (~ 3%)
- AUMENTO DELLA CONCENTRAZIONE
EMOGLOBINICA (~ 14%)
EMATOCRITO
45
35
25
15
NORMOBLASTI E
RETICOLOCITI
RETICOLOCITI
CIRCOLANTI
1.5
2.5
3.0
3.5
CORRELAZIONE FRA EMATOCRITO E TEMPI
DI MATURAZIONE MIDOLLARI ED EMATICI
MISURA DEL TURNOVER ERITROCITARIO PER
MEZZO DEL CONTEGGIO RETICOLOCITARIO
- UTILIZZARE IL CONTEGGIO ASSOLUTO (x 10 9 /L)
- CORREGGERE PER IL TEMPO DI MATURAZIONE
(RETICOLOCITI DA SHIFT)
- IN ALTERNATIVA AL PRECEDENTE UTILIZZARE L’IRF
TEMPO DI MATURAZIONE DEI RETICOLOCITI IN VARIE
CONDIZIONI PATOLOGICHE
From Baldini and Pannaciulli 1960
0 70 140
LHASS
0 70 140
ADASS
0 70 140
CDASS
Advia
33 -104
CD 4000
28 -119
LH 750
18 - 114
0 70 140
PENASS
0 70 140
XEASS
0 70 140
REFASS
Pentra
30 - 105
XE 2100
27 - 99
Riferimento
29 -129
RETICOLOCITI:
INTERVALLI DI RIFERIMENTO x109/L
IRF: FRAZIONE IMMATURA DEI RETICOLOCITI
- CORRISPONDE AI RETICOLOCITI AD
ELEVATO CONTENUTO IN RNA
- VARIABILE DA 0.0 A 1.0
- ESPRIME L’ATTIVITA’ ERITROPOIETICA
MIDOLLARE “PRECOCE”
APPLICAZIONI CLINICHE CONSOLIDATE
(Reticolociti: IRF)
1) Controllo precoce della ripresa eritropoietica dopo
trapianto di midollo o aplasia comunque indotta
2) Classificazione delle anemie ( ret, IRF: emolitiche o
da perdita; ret, IRF: ridotta attività midollare; ret,
IRF: infezione o MDS)
3) Controllo dell’efficacia della terapia (forme carenziali, EPO)
4) Diagnosi di anemia aplastica
IRF: INTERVALLI DI RIFERIMENTO
0.00 0.12 0.24 0.36
PENIRF2
0.00 0.06 0.12 0.18
XEIRF2
0.00 0.12 0.24 0.36
IRFAD2
0.0 0.3 0.6 0.9
CDIRF
0.0 0.3 0.6 0.9
LHIRFAdvia
0.06 – 0.20
CD 4000
0.20 – 0.40
LH 750
0.22 – 0.40
XE 2100
0.02 – 0.11
Pentra
0.09 – 0.17
Simel- emat
Bulian, Doretto 2004
INDICI RETICOLOCITARI
-ABBOTT SAPPHIRE MCVr, MCHr
-ABX HORIBA PENTRA 120 Retic MCVr
- SIEMENS ADVIA 2120 MCVr, CHr
- BECKMAN COULTER LH 750 MSRV
- SYSMEX XE 5000 RET-He
MCVr: volume reticolocitario medio; CHr: contenuto emoglobinico
reticolocitario medio; MRSV: volume cellulare medio dei reticolociti
sfericizzati; RET-He: equivalente emoglobinico espresso in pg
APPLICAZIONI CLINICHE CONSOLIDATE
(reticolociti: CHr/Ret He)
1) Diagnosi di eritropoiesi ferrocarente
2) Diagnosi di deficit funzionale di ferro (dializzati o altre
condizioni di trattamento con EPO)
3) Controllo della risposta alla somministrazione di ferro
(ev o os)
1) Diagnosi di eritropoiesi ferrocarente
2) Verifica precoce della risposta alla somministrazione di
ferro
3) Controllo precoce della risposta alla somministrazione di
acido folico e cianocobalamina
4) Controllo dell’abuso di eritropoietina nello sport (Ht-ret)
APPLICAZIONI CLINICHE CONSOLIDATE
(reticolociti: MCVr)
CHret/Ret He/MCHr: INTERVALLI DI
RIFERIMENTO NELLA POPOLAZIONE
ADULTA
Parametro mediana 2.5° 97.5°
CHret (pg) 32.2 30.1 34.6
Ret He (pg) 32.9 30.7 35.3
MCHr (pg) 29.9 28.5 34.5
Buttarello 2009/Hoffmann 2012
Parametro mediana 2.5° 97.5°
MCVr (fL) 102 91 111
Pentra
MCVr (fL) 106 100 114
ADVIA 120
MSRV (fL) 108 98 120
LH 750
SAPPHIRE (fL) - 92 116
MCVr: INTERVALLI DI
RIFERIMENTO NELLA
POPOLAZIONE ADULTA
VALUTAZIONE DELLA RISPOSTA
TERAPEUTICA CON I MODERNI INDICI
RETICOLOCITARI
0
1
2
3
4
5
RE
TIC
OL
OC
ITI
(%)
90
100
110
120
130
140
150
MC
Vr
(fL
)
-5 0 5 10 15
GIORNI
RET %
MCVr
20
25
30
35
40
CH
r (p
g)
CHr
INIZIO TERAPIA
CON B12
INIZIO TERAPIA
CON FERRO
50
100
150
200
250
RE
TIC
OL
OC
ITI
(x 1
09/L
)
80
90
100
110
120
130 M
CV
r (f
l)
0 5 10 15
GIORNI
RET
MCVr
20
25
30
35
CH
r (p
g)
CHr
INIZIO TERAPIA
CON FERRO M.Buttarello